PCR實驗室又叫基因擴增實驗室。PCR是一種分子生物學(xué)技術(shù),通過這項技術(shù)能夠放大特定的DNA片段,就好像是生物體外的特殊DNA復(fù)制一樣。通過PCR實驗室的實驗,就能夠迅速掌握待檢品中的病毒含量,其精確度高達納米級別。下面就由萬致小編來為大家分析一下PCR實驗室設(shè)計的區(qū)域劃分情況吧。
PCR實驗室在平面布局中可以分成四個單獨工作區(qū)域:試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴增反應(yīng)混合物配制和擴增區(qū)、擴增產(chǎn)物分析區(qū)。這四個區(qū)域是被嚴(yán)格劃分開的,有明顯的區(qū)域界線。為避免交叉污染,進入各個工作區(qū)域必須嚴(yán)格遵循單一方向進行,即只能從試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴增反應(yīng)混合物配制和擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)。各實驗區(qū)之間的試劑及樣品傳遞應(yīng)通過傳遞窗進行。
1、試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū):此區(qū)域的作用是貯存試劑的制備、試劑的分裝、主反應(yīng)混合液的制備。注意事項是實驗項目所使用的材料,如試劑與試劑原材料,標(biāo)本與標(biāo)本原材料等,這些都必須存放于本區(qū)內(nèi)。至于是否需要控制氣流壓力,本區(qū)倒是沒有嚴(yán)格要求。
2、標(biāo)本制備區(qū):此區(qū)域的作用是臨床標(biāo)本的保存、核酸(RNA與DNA)的提取與貯存、核酸加入至擴增反應(yīng)管和測定RNA時DNA的合成。注意事項是為了防止鄰近區(qū)域的空氣進入本區(qū),壓力梯度對比鄰近區(qū)域要設(shè)置成正壓。進行實驗項目的操作時,工作人員要避免不必要的走動,以防止加樣操作中發(fā)生氣溶膠污染。
3、擴增反應(yīng)混合物配制和擴增區(qū):此區(qū)域的作用是DNA擴增、把制備的實驗試劑做成反應(yīng)混合液。注意事項是實驗擴增的污染指數(shù)比較高,壓力梯度對比鄰近區(qū)域要設(shè)置成負壓,這樣做的好處是能有效防止氣溶膠從本區(qū)泄漏。
4、擴增產(chǎn)物分析區(qū):此區(qū)域的作用是測定相關(guān)擴增片段。注意事項是實驗室設(shè)計時如果已經(jīng)預(yù)設(shè)了全自動封閉分析儀器,那么就沒有必要再劃分本區(qū)了。本區(qū)的壓力梯度對比鄰近區(qū)域要設(shè)置成負壓,這樣做的好處是能有效防止擴增產(chǎn)物擴散至其它區(qū)域。
PCR實驗室設(shè)計除了要做好區(qū)域劃分外,完備的配套設(shè)施也是必不可缺的。這么說吧,它是保證實驗工作的必要條件,但要根據(jù)實驗內(nèi)容來配備相應(yīng)的設(shè)備和儀器,如超凈工作臺、生物安全柜、離心機、加樣器等。
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